단백질 분리와 전기 영동
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작성일 22-11-16 07:43
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6. 상층액(세포단백질)을 새 미세원침관으로 옮긴다. 이 용액은 SDS-PAGE에 이용할 수 있다아
2) 핵단백질(nuclear extract)의 분리
핵단백질의 분리는 1단계의 핵분리과정과 2단계의 단백질 분리과정으로 나눌 수 있으며, 핵을 분리하는 방법에 따라서 여러가지 방법이 있다아 순수한 핵단백질을 원하는 경우 핵분리를 순수하게 해야 하지만 시간과 노력이 많이 들기 때문에 여러가지 세포에서 동시에 분리하기에는 …(생략(省略))
,공학기술,레포트
1. 단층으로 자란 배양세포를 1 ml의 PBS로...
1) 전체 세포단백질(whole cellular extract)의 분리
다.
단백질 분리와 전기 영동
實驗(실험)방법
1) 전체 세포단백질(whole cellular extract)의 분리실험방법1. 단층으로 자란 배양세포를 1 ml의 PBS로... , 단백질 분리와 전기 영동공학기술레포트 ,
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1) 전체 세포단백질(whole cellular extract)의 분리
실험방법
1. 단층으로 자란 배양세포를 1 ml의 PBS로 두번 세척한다.
4. 1 ml pipette을 사용하여 수次例에 걸쳐 lysate를 올렸다, 내렸다를 반복하여 뻑뻑하지 않을 때까지 시행하면 genomic DNA가 모두 shearing 되었다고 볼 수 있다아
5. 이 용액을 미세원침관으로 옮기고 4°C,15,000 rpm에서 10분간 원심분리한다.
2. 배양접시에 붙은 상태로 얼음에 올려놓고 300 ml의 용해용액(RIPA 용액: 150 mM NaCl, 1% NP-40, 0.5% DOC[deoxycholic acid], 0.1% SDS, 50 mM Tris-Cl, pH 7.5)을 가한다.
3. 30분간 가끔씩 흔들면서 얼음에 둔다.
